EBM-2培養基國內家代理公司---始于2001年畢特博生物

以下是網頁的對話內容摘要

請教：
國內哪家公司代理有VEGF的EBM-2培養基。

是畢特博嗎。

寒冰 wrote:
請教：
國內哪家公司代理有VEGF的EBM-2培養基。

是畢特博嗎。

我查到的也就只有這家

以下是來源網址的具體內容：
http://www.med66.com/html/ziliao/yixue/19/23da6eee3d452c3c3ea8e61068369229.htm
請問用什么培養液好啊
tonywujun wrote:
同志們，這段時間養小鼠骨髓來源的EPC出現奇怪現象，其中一些細胞4天后快速增殖，迅速形成片狀集落，細胞可以排列形成線樣結構，且可以融合，有些還有分支，形成的結構很像帶有分支的血管，奇怪了，我從來沒有見過這種細胞，請各位戰友幫忙看看這可能是什么細胞。
一張100倍的圖

應該是瓶子上的劃痕留下的。細胞沿著劃痕生長，看看我養的細胞，更漂亮。呵呵，當時覺得不可思議。其實，是個肝癌細胞而已。

（縮略圖，點擊圖片鏈接看原圖）

不過，我做實驗，發現好多次，原代EPC培養的時候，確實會出現部分細胞連接成環狀，幾乎每次原代都可以發現。可以肯定，不是劃痕所造成的，下圖是比較典型的一張，偷懶，沒有用攝像頭拍，用數碼相機拍的，所以拍攝效果不太好。‘

（縮略圖，點擊圖片鏈接看原圖）

個人同意yulinlong戰友的觀點。
yulinlong戰友的圖片又多又漂亮，與他相比真是遜色多了，
匿了。

首先我肯定的是這不是fibronectin劃痕造成的結果，培養皿內形成的片狀細胞團塊很大，目前已經對此細胞進行了lectin和CD31的免疫熒光鑒定，不表達，基本上表明其不是內皮及其前體細胞，具體是什么細胞還不清楚，但從形態上講，不像成纖維細胞、內皮細胞、平滑肌細胞、骨骼肌細胞、心肌細胞，不管怎樣，以前從來沒有見過，且比較了所有相關帖子上的細胞，沒有見到相類似的細胞，真是郁悶呀，哪位高人提供一下線索呀。

用國產淋巴細胞分離液分離、提取白膜層后老是混有較多的紅細胞，其影響單個核細胞的貼壁。本人所在實驗室建議使用蒸餾水破除。
請問各位高手，你們是怎么處理這些紅細胞的？
另外使用羥乙基淀粉法效果好嗎？

小小鳥 wrote:
八戒兄：
你在實驗中也能將外周血單核細胞濃度調整到1*10的9次方/L？真是羨慕啊。不過聽我師姐說外周血單核細胞不多，要將10 ml的血分離出這么多單核細胞我還是有點詫異。請問八戒兄也是用10ml血分離的嗎？

1*10的9次方/L只是個濃度問題，并不是個數量，10ml血分離1*10的9次方/L×
10ml,是不是？

1*10的9次方/L只是個濃度問題，并不是個數量，10ml血分離1*10的9次方/L×
10ml,是不是？

這個我明白，但我從文獻上看到：成年循環EPCs數量非常有限（100～500個/ml），照1*10的9次方/L×10ml這樣算，10ml外周血有10的7次方EPCs，還是跟文獻不符啊

請教：
國內哪家公司代理有VEGF的EBM-2培養基。

是畢特博嗎。

寒冰 wrote:
請教：
國內哪家公司代理有VEGF的EBM-2培養基。

是畢特博嗎。

我查到的也就只有這家

在學習了playingstone 戰友的2篇大作（一篇已經發表：生物醫學工程與臨床，2005，7，9（4）243～246.恭喜恭喜）之后，受益頗豐：
1.playingstone 戰友培養方法比較有新意，綜合了目前2種有爭論的培養方法。我想問下48h內貼壁細胞和48h后貼壁細胞中內皮祖細胞的純度比較問題，哪個更純一些？也就是說哪個內皮祖細胞含量更多些？
2.playingstone 戰友采用骨髓來源的培養方法，在用密度為1.071的淋巴細胞分離液（上海華精生物制品廠）進行梯度密度離心分離單核細胞，18℃,1500r/min離心23min后。想問下，實驗室采用的是什么離心機，哪個廠家的。因為我們自己也在用這種淋巴細胞分離液，效果很不好，用的是Beck man高效離心機，400g，30min，效果很差，幾乎看不到白膜層，連紅細胞都沒離心下來，試劑是剛買的，未過期。很是郁悶。
3.playingstone 戰友在離心后，似乎未經過洗這一步，就直接制成細胞懸液，是不是在骨髓來源的培養方法中是這樣的呢，有點疑問？呵呵
謝謝，歡迎討論！
一般是800G的離心力，既然你的機子是400G 那就把轉速適當調高就是，比方現在是1500R/M,先調到2500R/M左右試試。,

小小鳥 wrote:
八戒兄：
你在實驗中也能將外周血單核細胞濃度調整到1*10的9次方/L？真是羨慕啊。不過聽我師姐說外周血單核細胞不多，要將10 ml的血分離出這么多單核細胞我還是有點詫異。請問八戒兄也是用10ml血分離的嗎？

我是10毫升分大約10的7 單個核細胞的

兩個問題：
1.UEA-I和DiLDL雙染色陽性細胞為正在分化的EPCs的原理是什么？而且我見一篇文獻竟然用是否DiLDL染色陽性區別EPC和EC，不解
2.有用多聚賴氨酸代替Fn包板的嗎？

請都各位，我準備培養大鼠的EPC，不知大家所用的VEGF和b-FGF是哪家公司的，有小包裝嗎？

下面是一篇blood上的如何培養EPC的文獻，希望對大家有用。文件太大（475kb)，不能上傳，所以給出全文摘要。

EPC生長特征.doc (35.0k)

我們買的VEGF是 sigma公司的，2微克包裝的，500塊錢，bFGF沒買，我們用的是M199培養基＋VEGF＋PEX＋20％FBS養的兔的EPC，效果還行。
以前用的是EGM培養基，后來有一陣子EGM國內缺貨，就改用了上述配方。
兩種相比較，EGM培養基培養細胞的狀態穩定一些，而且細胞生長較均勻，現在用的這這種培養基養的EPC原代的時候全部成簇狀生長，也就是說一個培養瓶里長幾大團細胞，沒有細胞簇的地方幾乎都是空的。長了6天以后有細胞的地方非常密，我們就消化，把細胞吹下來后還是放在原瓶里長，細胞就長得比較均勻了，生長速度也還可以。
以前用EGM時我們用的是5％血清濃度，現在用M199是20％血清濃度，但是感覺還是沒有EGM時長得快。

請教大家：
加VEGF誘導骨髓細胞應在什么時候加？大概傳幾代啊？

寒冰 wrote:
請都各位，我準備培養大鼠的EPC，不知大家所用的VEGF和b-FGF是哪家公司的，有小包裝嗎？

下面是一篇blood上的如何培養EPC的文獻，希望對大家有用。文件太大（475kb)，不能上傳，所以給出全文摘要。

幫你把全文上傳下
分成2部分，都下載后，放在同一個文件下，然后解壓part1就可以了。

2577.part1.rar (244.14k)

22222222222222222222222222222

2577.part2.rar (211.6k)

請問cici_wl 師兄：

你是培養大鼠EPC嗎，EGM是哪家公司的，培養板包被了嗎，是自己包的嗎？

謝謝。

playingstone前輩，請教您一下：
骨髓源的內皮祖細胞是本身就存在于骨髓的，而不是由MSCs分化而來的嗎？如果是，它的前身是什么？
MSCs能不能分化為內皮祖細胞，還是只能分化為成熟內皮細胞？
我見到的文獻好像不管是骨髓、外周血、臍血的內皮祖細胞，都是直接就用內皮細胞誘導培養基培養。就您所知，有沒有先擴增MSCs，再將其誘導為EPCs的？

請問各位:你們消化EPC時候,覺得好消化嗎?含EDTA的胰酶大概要作用多久啊?
我消化了15分鐘(37度),吹打了幾次才勉強下來!!

請問：

用DMEM低糖 和 高糖 的培養基對細胞的影響是什么呢？為什么MSC要用低糖的呢？

懇請指教。謝謝！

harry158:

你好，我也打不開下面這篇綜述，能否發一份到郵箱(newbyte163@163.com)

綜述 <Unresolved questions, changing definitions, and novel paradigms for defining endothelial progenitor cells >
(blood ,106,1525-1531).

我已經分離了數次臍血里的EPC,大家說的這些我好象似曾見過,可鑒定時總是CD133(-)和CD34(-),但每次貼負在FIBRONECTIN上細胞也不少,我真不知道如果不是EPC會是什么,作了快3個月了,一直這樣,都快崩潰了,大家幫我出出主意吧,多謝.

meini:
這片文獻上有很漂亮的EPC集落 "Granulocyte Colony-Stimulating Factor Mobilizes Functional Endothelial Progenitor Cells in Patients With Coronary Artery Disease"(Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2005;25:296-301.)
是pdf 文件,不知道怎么上傳,如果有需要請告訴我郵箱.
我的郵箱是newbyte163@163.com,非常感謝.

求合購：

我現已問好小鼠CD 133 和FLK－1 上流式檢測抗體，最小包裝分別為25微克和50微克。（為Biosource公司產品）（都可以上100管以上）

由于本人只能用一半的量。價錢比較昂貴。想找位戰友一起分享。我在武漢。有意者請與我聯系。qq 358228927。 手機：13476210795

急！！急！！急！！

不好意思，才回貼。前一段時間出去開會。
現在EPC培養有些進展，也拍了圖片，但我的圖片都比較大，不能上傳，如你感興趣我可以發給你。從形態、FCM還是IHC均是EPC。

請問羥乙基淀粉沉淀紅細胞怎么做？

不好意思，才回貼。前一段時間出去開會。
現在EPC培養有些進展，也拍了圖片，但我的圖片都比較大，不能上傳，如你感興趣我可以發給你。從形態、FCM還是IHC均是EPC。

請問羥乙基淀粉沉淀紅細胞怎么做？

樓上的PDF文件均打不開，各位都能否MAIL給我。再次感激不禁。我有的東西，不會讓各位失望的。多多交流。xiexie
my mail： dryudecai@hotmail.com

強烈建議我們開個網絡會議！
方式： Hotmail MSN
時間待定：大家商量
我想一起聊天，可能效果更好

為表誠意，我先貼有關EPC的reriew。
多指教

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