lonza 無(wú)血清 培養(yǎng)基　相關(guān)鏈接http://bitebo.com/a/gb2312/gongsixinxi/shichanghuodong/2014/0514/5157.html

目的 通過(guò)無(wú)血清培養(yǎng)法初步富集人結(jié)腸癌Caco-2干細(xì)胞，并探討其可行性，以期為Caco-2干細(xì)胞的有效分選方法提供一種思路，為結(jié)腸癌的研究構(gòu)建一種新的干細(xì)胞模型。耐藥性，行免疫熒光染色檢測(cè)結(jié)腸癌干細(xì)胞特異性標(biāo)記物CD133的表達(dá)。腫瘤干細(xì)胞球，并能連續(xù)傳代，將其重懸于含血清培養(yǎng)基后，能分化成貼壁的單層細(xì)胞；Caco-2腫瘤干細(xì)胞球可在含血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)基的交替培養(yǎng)中發(fā)生相應(yīng)轉(zhuǎn)化；耐藥實(shí)驗(yàn)顯示一部分Caco-2腫瘤干細(xì)胞球來(lái)源的單細(xì)胞能在添加了化療藥物的無(wú)血清培養(yǎng)基中存活并重新增殖成球，無(wú)藥物干預(yù)組、5-氟尿嘧啶干預(yù)組、奧沙利鉑干預(yù)組、5-氟尿嘧啶聯(lián)合奧沙利鉑干預(yù)組形成的Caco-2腫瘤干細(xì)胞球的數(shù)目分別為：（10.0±1.15）個(gè)/孔、（16.1±1.52）個(gè)/孔、（17.5±1.43）個(gè)/孔、（18.8±1.14）個(gè)/孔，4組的成球數(shù)都存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P< 0.05）：5-氟尿嘧啶聯(lián)合奧沙利鉑干預(yù)組>奧沙利鉑干預(yù)組>5-氟尿嘧啶干預(yù)組>無(wú)藥物干預(yù)組；免疫熒光染色顯示Caco-2腫瘤干細(xì)胞球呈現(xiàn)橙紅色熒光，即為CD133陽(yáng)性表達(dá)。

　　方法 將人結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞接種于無(wú)血清培養(yǎng)基中以初步富集Caco-2干細(xì)胞，觀察其生長(zhǎng)增殖過(guò)程，通過(guò)含血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)基交替培養(yǎng)誘導(dǎo)其分化，利用5-氟尿嘧啶、奧沙利鉑驗(yàn)證其

　　結(jié)果 一部分Caco-2細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基中逐漸增殖形成懸浮的

　　結(jié)論 人結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞可以在無(wú)血清培養(yǎng)基中形成懸浮的腫瘤干細(xì)胞球，它具有自我更新、不斷增殖、分化和耐藥的能力，能表達(dá)結(jié)腸癌干細(xì)胞特異性標(biāo)記物CD133；無(wú)血清培養(yǎng)聯(lián)合化療藥物干預(yù)比單純采用無(wú)血清培養(yǎng)有利于Caco-2干細(xì)胞的富集，奧沙利鉑的富集效率高于5-氟尿嘧啶，二者聯(lián)用的富集效率高于單藥；通過(guò)無(wú)血清培養(yǎng)法可以初步富集到人結(jié)腸癌Caco-2干細(xì)胞的樣細(xì)胞。

　　（摘自2012中國(guó)消化系疾病學(xué)術(shù)大會(huì)論文集）

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