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生物資訊

無(wú)血清培養(yǎng)基的相關(guān)知識(shí)

作者:admin 來(lái)源:本站 發(fā)布時(shí)間: 2014-09-25 14:12  瀏覽次數(shù):
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lonza 無(wú)血清 培養(yǎng)基  網(wǎng)址鏈接 http://bitebo.com/a/gb2312/gongsixinxi/shichanghuodong/2013/0331/5024.html

 

誰(shuí)能幫忙總結(jié)一下,無(wú)血清培養(yǎng)基的成分,用于什么方面,注意什么,優(yōu)缺點(diǎn)等等。

無(wú)血清培養(yǎng)基是設(shè)計(jì)用來(lái)在無(wú)血清條件下生長(zhǎng)特殊類(lèi)型的細(xì)胞或進(jìn)行專(zhuān)門(mén)應(yīng)用的培養(yǎng)基。無(wú)血清培養(yǎng)基的使用體現(xiàn)了一種重要的工具,它允許細(xì)胞培養(yǎng)在一套限定的條件下進(jìn)行,盡可能免于干擾參數(shù)的影響。

優(yōu)點(diǎn):增加確定性,性能更加一致,容易進(jìn)行純化和下游加工,細(xì)胞功能的精確評(píng)估,增強(qiáng)生長(zhǎng)和增加產(chǎn)量,生理反應(yīng)性的較好對(duì)照,增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)中介物的檢測(cè)。
無(wú)血清培養(yǎng)基中沒(méi)有添加血清,但可能包含個(gè)別蛋白或大量蛋白組分。
無(wú)血清培養(yǎng)基的用途很廣,如血液和骨髓細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞、293細(xì)胞、中華倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等均有相應(yīng)的無(wú)血清培養(yǎng)基可供選擇。
在使用無(wú)血清培養(yǎng)基時(shí),有些細(xì)胞需要逐漸適應(yīng)的過(guò)程,即先將原來(lái)的培養(yǎng)基與無(wú)血清培養(yǎng)基混合培養(yǎng),漸漸地再轉(zhuǎn)為完全的無(wú)血清培養(yǎng)。有些貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,復(fù)蘇時(shí)可用少量的血清(如5%)先培養(yǎng),因?yàn)檠蹇芍?xì)胞貼壁,然后再換為無(wú)血清培養(yǎng)基。
 
由于天然培養(yǎng)基都含有血清,血清的成分十分復(fù)雜,對(duì)某些研究,血清可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,因此無(wú)血清培養(yǎng)基日益受到人們的重視。
無(wú)血清培養(yǎng)基由下面成分組成:
1 基礎(chǔ)培養(yǎng)液
很多人工合成的培養(yǎng)基使用的是HamF12 和DMEM培養(yǎng)液(1:1混合),補(bǔ)加15mM的HEPES ,1.2g/升NaHCO3,根據(jù)不同的細(xì)胞需求還補(bǔ)加其它成分.
2 附加成分
a,細(xì)胞外基質(zhì),能幫助細(xì)胞附著
b,營(yíng)養(yǎng)成分,能促進(jìn)細(xì)胞增殖,如多種生長(zhǎng)因子
c,蛋白酶抑制物
 
 
 無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點(diǎn):
一、優(yōu)點(diǎn):
1、無(wú)血清培養(yǎng)基完全采用人工合成的化合物,因此成分確定,可以排除血清中未知成分的干擾,實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為可靠。
2、采用無(wú)血清培養(yǎng)基更容易發(fā)現(xiàn)一些在血清培養(yǎng)基中不容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子。
3、采用無(wú)血清培養(yǎng)基可提高生物制品的質(zhì)量,純度,方便產(chǎn)物的分離純化,減少過(guò)敏源。
二、缺點(diǎn):
1、成本較高。
2、針對(duì)性很強(qiáng),一種無(wú)血清培養(yǎng)基僅適合某一類(lèi)細(xì)胞的培養(yǎng)。
 
由于天然培養(yǎng)基都含有血清,血清的成分十分復(fù)雜,對(duì)某些研究,血清可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,因此無(wú)血清培養(yǎng)基日益受到人們的重視。
無(wú)血清培養(yǎng)基由下面成分組成:
1 基礎(chǔ)培養(yǎng)液
很多人工合成的培養(yǎng)基使用的是HamF12 和DMEM培養(yǎng)液(1:1混合),補(bǔ)加15mM的HEPES ,1.2g/升NaHCO3,根據(jù)不同的細(xì)胞需求還補(bǔ)加其它成分.
2 附加成分
a,細(xì)胞外基質(zhì),能幫助細(xì)胞附著
b,營(yíng)養(yǎng)成分,能促進(jìn)細(xì)胞增殖,如多種生長(zhǎng)因子
c,蛋白酶抑制物
作者:xxiil 時(shí)間:2009-08-24  共0人支持此評(píng)論
 無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點(diǎn):
一、優(yōu)點(diǎn):
1、無(wú)血清培養(yǎng)基完全采用人工合成的化合物,因此成分確定,可以排除血清中未知成分的干擾,實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為可靠。
2、采用無(wú)血清培養(yǎng)基更容易發(fā)現(xiàn)一些在血清培養(yǎng)基中不容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子。
3、采用無(wú)血清培養(yǎng)基可提高生物制品的質(zhì)量,純度,方便產(chǎn)物的分離純化,減少過(guò)敏源。
二、缺點(diǎn):
1、成本較高。
2、針對(duì)性很強(qiáng),一種無(wú)血清培養(yǎng)基僅適合某一類(lèi)細(xì)胞的培養(yǎng)。     
作者:xxiil 時(shí)間:2009-08-24  共0人支持此評(píng)論
無(wú)血清培養(yǎng)基分為三種:一種是SFM(Serum free)不含血清,但是有蛋白質(zhì)。一種是PFM(Protein Free)血清和蛋白質(zhì)都沒(méi)有,可能會(huì)有些短肽。CDM(chemical define)純化學(xué)合成的,成分完全已知。至于究竟要選擇那種無(wú)血清培養(yǎng)基,要看自己的細(xì)胞種類(lèi),以及用途來(lái)定了。

1.無(wú)血清培養(yǎng)基一般用于細(xì)胞清洗,大部分細(xì)胞都不能用無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng),否則細(xì)胞很難存活.
 2.部分細(xì)胞在消化培養(yǎng)后先用含血清培養(yǎng)基培養(yǎng),待細(xì)胞完全貼壁后可換無(wú)血清培養(yǎng)基,以消除血清成分對(duì)實(shí)驗(yàn)處理因素的干擾.
 3.在生長(zhǎng)因子、蛋白質(zhì)工程、基因表達(dá)調(diào)控等研究領(lǐng)域,迫切需要用無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞,因?yàn)榛蚬こ讨饕獙?duì)象是蛋白質(zhì).
 4.無(wú)血清培養(yǎng)基目前發(fā)展還屬于初級(jí)階段,還不能取代完全培養(yǎng)基的主要地位.

 

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