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近日獲悉，中國(guó)科學(xué)院南海海洋研究所研究員秦啟偉研究團(tuán)隊(duì)與長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所研究員王宏達(dá)合作，首次將單病毒粒子示蹤技術(shù)應(yīng)用于水生經(jīng)濟(jì)動(dòng)物大分子DNA病毒研究，從時(shí)間、空間尺度多層次揭示了石斑魚虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus, SGIV)侵染宿主活細(xì)胞的機(jī)制，有助于深入理解SGIV的致病機(jī)理和提供理想的病毒-細(xì)胞模型，相關(guān)成果發(fā)表在Journal of Virology， 2014，88，13047-13063。
據(jù)介紹，病毒是非細(xì)胞形態(tài)的生命體，只能借助宿主細(xì)胞完成自身的復(fù)制和繁衍，SGIV是從患病養(yǎng)殖石斑魚中分離的一種高致病性虹彩病毒，屬于虹彩病毒科蛙病毒屬的一個(gè)新種。研究人員應(yīng)用單顆粒成像與示蹤技術(shù)并結(jié)合分子生物學(xué)手段，實(shí)時(shí)追蹤了單個(gè)SGIV的病毒粒子進(jìn)入石斑魚宿主細(xì)胞的精細(xì)動(dòng)態(tài)過(guò)程，觀察到SGIV是借助細(xì)胞表面的絲狀偽足進(jìn)入細(xì)胞。
研究人員還利用不同胞吞途徑的抑制劑，通過(guò)單粒子成像、免疫熒光及western blot檢測(cè)，揭示SGIV進(jìn)入宿主細(xì)胞是通過(guò)網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)、pH依賴的胞吞途徑而不通過(guò)小窩蛋白介導(dǎo)的胞吞途徑，且首次發(fā)現(xiàn)SGIV可通過(guò)巨胞飲途徑進(jìn)入宿主細(xì)胞。在活細(xì)胞內(nèi)，追蹤單個(gè)SGIV病毒粒子可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)病毒在胞內(nèi)的運(yùn)動(dòng)情況，發(fā)現(xiàn)SGIV在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)動(dòng)需要依賴微絲和微管。
該成果由王劭雯、黃曉紅、黃友華等完成，獲得“973”計(jì)劃項(xiàng)目、國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目資助。
SGIV侵染宿主細(xì)胞的內(nèi)吞方式及胞內(nèi)運(yùn)輸。(A)SGIV單個(gè)病毒粒子進(jìn)入細(xì)胞的動(dòng)態(tài)過(guò)程;(B)SGIV進(jìn)入細(xì)胞依賴于網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑;(C)SGIV進(jìn)入細(xì)胞依賴于巨胞飲途徑;(D)SGIV胞內(nèi)的運(yùn)輸依賴于微管和微絲。
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