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生物知識(shí)

ELISA常見(jiàn)問(wèn)題及處理對(duì)策

作者： 來(lái)源： 發(fā)布時(shí)間： 2009-12-29 15:38　 瀏覽次數(shù)：
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可能原因

解決方法

洗滌操作不規(guī)范
洗板不充分，使用手工洗板常出現(xiàn)。最好使用洗板機(jī)，或使用洗瓶洗滌。在兩次洗板之間加30秒的浸泡。
實(shí)驗(yàn)中孵育溫度和時(shí)間不恰當(dāng)

確定每一實(shí)驗(yàn)步驟的孵育溫度和時(shí)間是否適當(dāng)。

酶加量過(guò)多 加酶前驗(yàn)看移液器調(diào)節(jié)量是否準(zhǔn)確。檢查稀釋度，若必要進(jìn)行效價(jià)測(cè)定。
封閉不完全
檢查封閉液的計(jì)算量，提高封閉時(shí)間。
標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品的干擾物質(zhì) 做適當(dāng)?shù)膶?duì)照。
顯色劑受光照時(shí)間較長(zhǎng)或污染 顯色劑A和B應(yīng)于使用前10分鐘從冰箱取出。
整批樣品放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)樣品污染
樣品應(yīng)保持新鮮，或低溫保存防止污染。
緩沖液污染
制備新鮮的緩沖液。
吸頭重復(fù)使用未洗凈或消毒不完全而用于加酶或顯色劑
吸頭盡可能一次性使用。

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