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細(xì)胞培養(yǎng)

品 名:細(xì)胞培養(yǎng)

拼音:xibaopeiyang

英文名稱：culture of cells

說明:包括微生物細(xì)胞、植物細(xì)胞和動物細(xì)胞培養(yǎng)。將動植物組織或細(xì)胞從機(jī)體取出，分散成單個細(xì)胞或直接以單細(xì)胞生物，使其在含有必要生長條件的培養(yǎng)基或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)生長與增殖。細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞生物學(xué)研究方面十分重要的技術(shù)。細(xì)胞周期及其調(diào)控、癌變機(jī)理、衰老、基因表達(dá)與調(diào)控等重要進(jìn)展都離不開細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。植物細(xì)胞培養(yǎng)為植物育種開辟了一條嶄新的途徑。大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)為營養(yǎng)品、疫苗生產(chǎn)以及藥物研究、開發(fā)與腫瘤防治提供了全新的手段。原核生物、病毒培養(yǎng)為基因工程等現(xiàn)代生物工程提供了必要條件。

細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識

[討論] 細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識

細(xì)胞培養(yǎng) （cell culture）細(xì)胞培養(yǎng)的含義，簡單地說即是把來自機(jī)體的組織經(jīng)分散成為單個細(xì)胞，放在類似于體內(nèi)的體外環(huán)境中生存，使其不斷生長、繁殖或傳代，借以觀察細(xì)胞的生長、繁殖、衰老等生命現(xiàn)象。還可以利用細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞工程與細(xì)胞癌變等重大問題的研究。細(xì)胞培養(yǎng)也是研究病毒與研制疫苗的基礎(chǔ)技術(shù)。因此細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在遺傳學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、病毒學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域已得到廣泛的應(yīng)用。下面介紹原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的基本概念。

原代培養(yǎng) 通過組織塊直接長出單層細(xì)胞或用酶或機(jī)械方法將組織分散成單個細(xì)胞開始培養(yǎng)，在首次傳代前的培養(yǎng)可認(rèn)為是原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)最大的優(yōu)點是，組織和細(xì)胞剛剛離體，生物性狀尚未發(fā)生很大變化，在一定程度上能反映體內(nèi)狀態(tài)。特別是在細(xì)胞培養(yǎng)會合時，原代培養(yǎng)的某些特殊功能表達(dá)尤為強(qiáng)烈。在這樣的培養(yǎng)階段能更好地顯示與親體組織緊密結(jié)合的形態(tài)學(xué)特征。在供體來源充分、生物學(xué)條件穩(wěn)定的情況下，采用原代培養(yǎng)做各種實驗，如藥物測試、細(xì)胞分化等，效果很好。但應(yīng)注意，原代培養(yǎng)組織是由多種細(xì)胞成分組成的，比較復(fù)雜。即使全為同一類型的細(xì)胞，如上皮細(xì)胞或成纖維細(xì)胞，也仍具有異質(zhì)性，在分析細(xì)胞生物學(xué)特性時比較困難。其次，由于供體的個體差異及其他一些原因，細(xì)胞群生長效果有時也不一致。

原代培養(yǎng)也是建立各種細(xì)胞系（株）必經(jīng)的階段。假如原代培養(yǎng)能夠維持幾小時甚至更長，即可進(jìn)行進(jìn)一步篩選。有的細(xì)胞具有繼續(xù)增殖能力，有的細(xì)胞類型只是存活而不增殖，而另外一些細(xì)胞只是在特殊條件下應(yīng)用而不存活，因而細(xì)胞類型的分布將會改變。在單層培養(yǎng)的情況下，瓶底全部鋪滿細(xì)胞，達(dá)到會合以后，對密度有依賴性的細(xì)胞則逐漸減少生長，而失去密度依賴敏感性的細(xì)胞則生長增加，天然或自發(fā)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞則過度生長。借助于頻繁傳代，保持細(xì)胞低密度生長，有利于保存細(xì)胞的正常表型（如小鼠成纖維細(xì)胞）。而自發(fā)轉(zhuǎn)化則傾向于高細(xì)胞密度的過度生長。

傳代培養(yǎng) 原代培養(yǎng)形成的單層細(xì)胞匯合以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生成空間不足或由于細(xì)胞密度過大引起營養(yǎng)枯竭，都將影響細(xì)胞的生長，這一程序常稱為傳代或傳代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)在首次傳代時即為細(xì)胞系，能連續(xù)培養(yǎng)下去的為連續(xù)細(xì)胞系；不能連續(xù)培養(yǎng)的為有限細(xì)胞系。通常，傳代培養(yǎng)是指擴(kuò)大培養(yǎng)，也就是將一份細(xì)胞一分為二或者一分為三進(jìn)行培養(yǎng)等。但嚴(yán)格說來，不論稀釋與否，將細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移或移植到另一個培養(yǎng)瓶即稱為傳代或傳代培養(yǎng)?？梢岳斫猓谌魏螘r候，細(xì)胞從一個瓶子接種到另一個瓶子時總會丟失一部分，因此，在客觀上細(xì)胞必定有所稀釋。

傳代代數(shù)這一概念常常容易同“增殖代數(shù)”相混淆。細(xì)胞“一代”一詞僅指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)時的一段時間。如某一細(xì)胞系為第 153代，即指該細(xì)胞系已傳代 153次。它與細(xì)胞“增殖代數(shù)”（細(xì)胞世代或倍增）不同，在細(xì)胞一代中，細(xì)胞約能倍增 3～ 6次。由此可見，細(xì)胞代數(shù)與增殖代數(shù)相關(guān)，確切的代數(shù)則依賴于細(xì)胞株和培養(yǎng)條件的不同而異。但構(gòu)成一個細(xì)胞系的生長條件必須是同樣的，因而細(xì)胞系應(yīng)該表達(dá)近似的增殖代數(shù)或倍增代數(shù)。

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