1．取產后的新鮮臍帶。如不立即培養可以保存于4℃中，但不宜超過12小時。無菌剪取長10～15厘米一段。其它如胚胎和幼體動物的大血管，亦可用于培養。

2．先用三通注射器吸溫PBS液注入臍帶的靜脈中，洗除殘血，注入口處宜用線繩結扎，以防液體返流。 

3．用血管鉗夾緊臍帶一端，從另端向臍靜脈中徐徐注入最終濃度為0.1％的膠原酶，待末端出現液體后結扎之，令充滿血管，注入口亦應結扎，以防液體返流，消化3～10分鐘。 

4．吸出含有內皮細胞的消化液，注入離心管中，為獲取更多細胞，可再注入溫PBS沖洗2～3次徹底清除干凈殘余細胞，一并注入離心管中離心。

5．吸除上清，加1640培養液，制成細胞懸液，接種入瓶皿中培養，順利時2～3天內細胞即可長成單層。

EGM-2培養基-LONZA細胞培養基

LONZA內皮細胞、支氣管上皮細胞生長培養基

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