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1.Corning MSC Xeno-Free SFM 的特點是什么？ Corning MSC Xeno-Free SFM 是一種化學成分限定的無任何動物源性蛋白的培養(yǎng)基，可支持不同來源（脂肪，骨髓，臍帶等）的人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)和擴增，并可以保持干細胞的分化能力，不需要對培養(yǎng)容器進行預包被即可在普通培養(yǎng)瓶中支持間充質(zhì)干細胞的長期培養(yǎng)，且可以維持其分化能力。
2.使用前培養(yǎng)瓶需要包被嗎？
不需要，培養(yǎng)基中添加的促進細胞貼壁組分，可以促使細胞在普通組織處理表面（TCT）良好貼壁， 同時推薦使用Corning 獨有的CellBIND 培養(yǎng)表面（T-25 flask, Corning # 3289）, 可使間充質(zhì)干細胞貼壁更好， 產(chǎn)量更高。
3.培養(yǎng)基使用是否要需要加入添加劑或抗生素?
該培養(yǎng)基為即用型完全培養(yǎng)基，不需要添加任何額外試劑。在細胞培養(yǎng)過程中可以添加抗生素來防止細菌污染，但是細胞治療應用，添加抗生素會有致敏的風險。
4.培養(yǎng)基的運輸和存儲條件是什么？
培養(yǎng)基中添加了各種生長因子，所以在存儲和運輸過程中需要冷凍（<-20℃）保存, 培養(yǎng)基在使用前于4℃或室溫融化，融化后建議4℃保存并于3-4周內(nèi)用完；每次使用前室溫平衡30min再使用；盡量避免培養(yǎng)基反復凍融，如用量不大，可將培養(yǎng)基分裝存儲于-20℃，可反復凍融1次使用。
5.建議細胞的接種密度是多少？
建議細胞的接種密度為5000 cells/cm²，如果是新復蘇細胞或第一次使用該培養(yǎng)基培養(yǎng)，建議細胞接種密度為10000 cells/cm².
6.是否可以用來做間充質(zhì)干細胞的原代分離培養(yǎng)？
否，該培養(yǎng)基是專為間充質(zhì)干細胞的擴增培養(yǎng)所設計，可支持不同來源間充質(zhì)干細胞的長期培養(yǎng)， 不能用于原代MSC 分離。
7.MSC 培養(yǎng)過程中如何傳代？
根據(jù)細胞接種密度和生長狀態(tài)，當細胞的融合度達到80%左右時，可進行細胞傳代，棄去培養(yǎng)基， 適量PBS（0.2ml/cm2）潤洗后棄去，加入適量商業(yè)化的胰酶替代物（Corning # 25-058-CL）消化， 顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶并吹打，使所有細胞解離表面，加適量PBS 稀釋胰酶替代物，離心1000rpm，5min 收獲細胞。（如果使用胰酶消化， 需要離心盡量去除胰酶，減少殘留）。
8.為什么細胞融合度不可超過90%？
細胞生長過密，會出現(xiàn)接觸抑制，繼而細胞活性會受到影響，導致后續(xù)傳代細胞生長緩慢或擴增倍數(shù)較低；并且產(chǎn)生接觸抑制后MSC 細胞容易分化。
9.為什么Corning CellBIND 表面會提高間充質(zhì)干細胞的收獲量
Corning CellBIND 表面利用獨有的表面處理技術(shù)，增加了細胞培養(yǎng)表面親水的持久性與細胞吸附的穩(wěn)定性，可以更好的支持貼壁細胞的培養(yǎng)，特別針對MSC 細胞，與Corning Xeno-Free SFM 聯(lián)合使用，可有效提高細胞的收獲量30%。
10.為什么不同來源的間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)時會有差異？
間充質(zhì)干細胞屬于原代細胞，會受到供體差異，組織來源差異及傳代次數(shù)的影響，細胞在培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)較大的差異。 Corning® MSC Xeno-Free SFM可支持脂肪、臍帶和骨髓來源的間充質(zhì)干細胞生長，細胞形態(tài)與間充質(zhì)干細胞表面標志物表達正常，并且擴增倍數(shù)和穩(wěn)定性整體表現(xiàn)良好。
11.該培養(yǎng)基是否可以培養(yǎng)其他動物來源的間充質(zhì)干細胞？
該培養(yǎng)基專為人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)擴增設計，目前不能應用于除人外其他動物來源的間充質(zhì)干細。
12.該培養(yǎng)基為沒有酚紅作為指示劑，其換液頻率是什么？
間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)過程中的換液頻率取決于細胞培養(yǎng)狀態(tài)和細胞接種密度，一般為3-4天進行換液，按照我們培養(yǎng)經(jīng)驗，接種密度為5000 cells/cm2, 可培養(yǎng)4天換液或傳代，接種密度為10000 cells/cm2, 可培養(yǎng)3天換液或傳代。
Corning® MSC Xeno-Free SFM 間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基
Corning® MSC Xeno-Free SFM特點
使用方便，無需額外添加物
無需包被，直接培養(yǎng)
• 脂肪來源間充質(zhì)干細胞 ADSC • 臍帶來源間充質(zhì)干細胞 UC-MSC • 骨髓來源間充質(zhì)干細胞BM-MSC
產(chǎn)品訂購信息
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Vessel |
Surface Area (cm2) |
Medium volume (mL) |
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T25 flask |
25 |
5 |
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T75 flask |
75 |
15 |
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T175 flask |
175 |
35-50 |
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CellSTACK |
636 (1 chamber) |
150 |
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HYPERflask |
1720 |
570 |
待細胞長滿后，細胞可收獲用于下游實驗或凍存。
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康寧相關產(chǎn)品 |
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貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
Qty/Pk |
Qty/Cs |
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21-040-CV |
PBS緩沖液 |
6 |
1 |
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25-051-CI |
0.05% Trypsin |
6 |
6 |
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430639 |
組織培養(yǎng)表面處理T-25 flask |
20 |
200 |
|
3289 |
CellBIND®表面處理 T-25 flask |
20 |
200 |
|
10024 |
HYPERflask |
4 |
24 |
|
3313 |
CellSTACK 5-chamber, TCT |
1 |
8 |
|
3311 |
CellSTACK 5-chamber, CellBIND |
1 |
2 |
http://www.gducity.com
400熱線：400-833-9299
電話：010-82015225
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聯(lián)系人：張鈺
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