| 小鼠活體成像實(shí)驗(yàn)主要實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目服務(wù) |
| 序號(hào) |
服務(wù)項(xiàng)目 |
具體描述 |
單價(jià)(元) |
實(shí)驗(yàn)周期 |
備注 |
| 1 |
Luciferase標(biāo)記的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建 |
先將要使用的腫瘤細(xì)胞用熒光素酶基因標(biāo)記，抗性可選puromycin和blasticidin兩種 |
3500 |
2-3周 |
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| 2 |
過(guò)表達(dá)某個(gè)基因慢病毒載體構(gòu)建 |
構(gòu)建進(jìn)帶有與步驟1中不同抗性篩選的載體，wb檢測(cè)基因表達(dá)情況 |
1500以上 |
1-4周 |
價(jià)格和試驗(yàn)周期需要由基因大小來(lái)決定 |
| 3 |
敲減某個(gè)基因慢病毒載體構(gòu)建 |
構(gòu)建進(jìn)帶有與步驟1中不同抗性篩選的載體，qPCR檢測(cè)基因敲減情況，一般選做3-4個(gè)靶點(diǎn) |
2800 |
1-2周 |
確保至少一條shRNA敲減效率達(dá)到70%以上 |
| 4 |
過(guò)表達(dá)或敲減慢病毒包裝 |
HEK293T中共轉(zhuǎn)目的基因質(zhì)粒和病毒包裝質(zhì)粒(psPAX2/pMD2.G),48/72小時(shí)后收取病毒上清 |
2000 |
1周 |
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| 5 |
過(guò)表達(dá)或敲減慢病毒感染腫瘤細(xì)胞株 |
病毒上清與polybrene混合，感染腫瘤細(xì)胞48-72小時(shí) |
1000 |
2-4天 |
用第1步驟中的標(biāo)記Luciferase細(xì)胞進(jìn)行該步感染實(shí)驗(yàn) |
| 6 |
穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株篩選 |
適量濃度的puromycin或blasticidin篩選4-6天，存活的細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)擴(kuò)增 |
3000 |
6-10天 |
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| 7 |
穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株結(jié)果驗(yàn)證 |
WB或qPCR驗(yàn)證過(guò)表達(dá)與敲減情況，同時(shí)驗(yàn)證熒光素酶活性 |
500 |
2-3天 |
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| 8 |
裸鼠購(gòu)買 |
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200元/只 |
1周 |
一般每組6-10只 |
| 9 |
裸鼠飼養(yǎng) |
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10元/只/天 |
4-6周 |
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| 10 |
腫瘤細(xì)胞尾靜脈注射 |
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80元/只 |
1天 |
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| 11 |
腫瘤細(xì)胞原位注射 |
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50-150元/只 |
1天 |
價(jià)格根據(jù)原位操作難度來(lái)定 |
| 12 |
活體成像檢測(cè) |
裸鼠麻醉，底物熒光素酶注射，儀器檢測(cè)熒光強(qiáng)度 |
80元/只/次 |
7天/次 |
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| 13 |
結(jié)果分析 |
熒光強(qiáng)度分析比較 |
300元 |
1周 |
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| 14 |
裸鼠解剖，組織保存 |
取出肺，淋巴結(jié)，肝臟等可能會(huì)有轉(zhuǎn)移的組織，福爾馬林及液氮保存 |
30元/只 |
1天 |
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總計(jì)（元）
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10-14周 |
/ |
| 說(shuō)明：2，3步驟按照實(shí)驗(yàn)具體情況可選擇其一來(lái)做，后續(xù)如果需要做IHC或H&E，另外收費(fèi)，其它條件按照客戶特殊實(shí)驗(yàn)要求來(lái)協(xié)商定價(jià) |
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