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產(chǎn)品介紹:

淋巴細(xì)胞分離液(LSM)以離心方式分離活淋巴細(xì)胞,產(chǎn)品為無菌液體包裝。

發(fā)布時(shí)間: :2011-03-11 10:34 瀏覽次數(shù): :
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品規(guī)格: 100ml 產(chǎn)品品牌: MP Biomedicals
參考價(jià)格::
詳細(xì)說明:

 

Lymphocyte Separation Medium
淋巴細(xì)胞分離試劑(LSM)          -----美國Mpbio公司
用途:
用于體外分離外周淋巴細(xì)胞,也可以從其他來源中分離單核細(xì)胞,包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞。
 
方法概述:
分離混合血液白細(xì)胞早期的方法,總是伴隨紅細(xì)胞聚集,只輕微影響白細(xì)胞。通過離心,紅細(xì)胞密度增加聚集,同時(shí)可以從離心管上部收集白細(xì)胞。
Boyum提出了一種更方便,通過使用Ficoll甲泛影鈉溶液離心快速分離方法。稀釋的血液在Ficoll甲泛影鈉溶液中分層,低速短時(shí)離心。紅細(xì)胞和沉降到管底的粒細(xì)胞,和單個(gè)核細(xì)胞(淋巴細(xì)胞)和血小板可以從兩個(gè)分層之間收集。
許多研究者不斷努力,修訂了Boyum方法,MP生物醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的LSM,方法的獨(dú)特之處是運(yùn)用泛影鈉成功的代替了甲泛影鈉。
 
程序原理:
除去血液中的纖維蛋白或肝素處理血液以11的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋,在分離溶液中分層,低速離心30分鐘。通過離心,遷移能力不同最終形成不同的細(xì)胞層。
大部分的紅細(xì)胞和粒細(xì)胞通過梯度遷移形成顆粒狀。由于其密度不同,淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞(單核細(xì)胞和血小板)分布在血漿和LSM兩層中間。淋巴細(xì)胞可以通過回抽分層回收,在進(jìn)一步去除血小板,LSM和血漿。
 
試劑:
LSM是一種滅菌過濾溶液,每100毫升包含6.2聚蔗糖和9.4鈉胺。密度是1.0770-1.0800/毫升20
 
使用說明:
以下的操作步驟是最初由Boyum設(shè)計(jì)的程序的眾多改良版本中的一種。此程序的改良是通過運(yùn)用除去血液中的纖維蛋白或搞凝血?jiǎng)┨幚砣梭w血液,這種改良對(duì)于其他物種來源血液或者其他組織非常有必要。
 
 

 
 
1.輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合
2.無菌轉(zhuǎn)移3mlLSM15ml離心管中
3.混合2ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液和2ml生理鹽水
4.仔細(xì)的將稀釋血液加入3mlLSM(室溫)于15ml離心管中,在血液和LSM中形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM
5.室溫下400g離心15-30分鐘,離心可以沉淀紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞同時(shí)可以再LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞。
6.吸出淋巴細(xì)胞上方2-3mm的血漿
7.吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM和轉(zhuǎn)移到另外的一個(gè)離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細(xì)胞離心管中,室溫離心10分鐘,離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞即刻,例如160-260×一(去除LSM和降低血小板的百分比)
8.用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細(xì)胞。
 
*        訂購信息:
貨號(hào)                                          品名                                             規(guī)格         
0850494X    LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM            l00ml                  
0850494      LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM            5x100 ml   
 
廠家說明:
MP Biomedicals生物醫(yī)學(xué)公司是位于美國加利福尼亞州的知名生命科學(xué)和生物技術(shù)廠商。2004年底成功收購QbiogeneICN,現(xiàn)在全球有5個(gè)大型倉庫,能夠及時(shí)供應(yīng)各行業(yè)需求,亞洲倉庫位于新加坡。它致力于生命科學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和探索。目前它提供55000多種產(chǎn)品,是世界上能全面提供生命科學(xué)產(chǎn)品和臨床診斷產(chǎn)品的幾家廠商之一。
 
 
 

 

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