Lymphocyte Separation Medium
淋巴細胞分離試劑(LSM) -----美國Mpbio公司
用途：
用于體外分離外周淋巴細胞，也可以從其他來源中分離單核細胞，包括臍帶血細胞和骨髓細胞。
方法概述：
分離混合血液白細胞早期的方法，總是伴隨紅細胞聚集，只輕微影響白細胞。通過離心，紅細胞密度增加聚集，同時可以從離心管上部收集白細胞。
Boyum提出了一種更方便，通過使用Ficoll甲泛影鈉溶液離心快速分離方法。稀釋的血液在Ficoll甲泛影鈉溶液中分層，低速短時離心。紅細胞和沉降到管底的粒細胞，和單個核細胞（淋巴細胞）和血小板可以從兩個分層之間收集。
許多研究者不斷努力，修訂了Boyum方法，MP生物醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的LSM，方法的獨特之處是運用泛影鈉成功的代替了甲泛影鈉。
程序原理：
除去血液中的纖維蛋白或肝素處理血液以1：1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋，在分離溶液中分層，低速離心30分鐘。通過離心，遷移能力不同最終形成不同的細胞層。
大部分的紅細胞和粒細胞通過梯度遷移形成顆粒狀。由于其密度不同，淋巴細胞和其他單個核細胞（單核細胞和血小板）分布在血漿和LSM兩層中間。淋巴細胞可以通過回抽分層回收，在進一步去除血小板，LSM和血漿。
試劑：
LSM是一種滅菌過濾溶液，每100毫升包含6.2克聚蔗糖和9.4克鈉胺。密度是1.0770-1.0800克/毫升20℃
使用說明：
以下的操作步驟是最初由Boyum設(shè)計的程序的眾多改良版本中的一種。此程序的改良是通過運用除去血液中的纖維蛋白或搞凝血劑處理人體血液，這種改良對于其他物種來源血液或者其他組織非常有必要。
1.輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合
2.無菌轉(zhuǎn)移3mlLSM到15ml離心管中
3.混合2ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液和2ml生理鹽水
4.仔細的將稀釋血液加入3mlLSM（室溫）于15ml離心管中，在血液和LSM中形成一個明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中
5.室溫下400g離心15-30分鐘，離心可以沉淀紅細胞和多核白細胞同時可以再LSM上形成一層單核淋巴細胞。
6.吸出淋巴細胞上方2-3mm的血漿
7.吸取淋巴細胞層以及它下面一半的LSM和轉(zhuǎn)移到另外的一個離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細胞離心管中，室溫離心10分鐘，離心速度設(shè)定在既不損傷細胞又能沉淀細胞即刻，例如160-260×一（去除LSM和降低血小板的百分比）
8.用平衡鹽緩沖液清洗細胞，用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細胞。
 訂購信息：貨號 品名 規(guī)格
0850494X LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM l00ml
0850494 LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM 5x100 ml
廠家說明：
MP Biomedicals生物醫(yī)學(xué)公司是位于美國加利福尼亞州的知名生命科學(xué)和生物技術(shù)廠商。2004年底成功收購Qbiogene、ICN，現(xiàn)在全球有5個大型倉庫，能夠及時供應(yīng)各行業(yè)需求，亞洲倉庫位于新加坡。它致力于生命科學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和探索。目前它提供55000多種產(chǎn)品，是世界上能全面提供生命科學(xué)產(chǎn)品和臨床診斷產(chǎn)品的幾家廠商之一。
北京畢特博生物技術(shù)有限責(zé)任公司
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