Hepa-IC XG003
檢測肝細胞癌(HCC)中鱗狀細胞癌抗原(SCCA)變異體免疫復合物的ELISA試劑盒
肝細胞癌 (HCC) 是當今世界上最為常見的惡性腫瘤之一, 其發生率在各種癌癥中位居第四. 它的預后非常差, 在診斷后的五年中存活率還不到5％.由于缺乏足夠的高特異性和高敏感性的生物學標志物來清楚區分肝細胞癌和其它受損肝臟，肝細胞癌的早期診斷還相當困難. 甲胎蛋白(AFP)是現在最普遍用于診斷肝細胞癌的血清學標志物,在大多數肝癌患者的血清中AFP水平有顯著升高(30-60％),但特異性較低(70-80%). 鱗狀細胞癌抗原 (SCCA)變異體是在肝臟外科手術切除的肝細胞腫瘤中發現的一種新型標志物,利用其抗體(Hepa-Ab)(1)的免疫組化技術(FIG.1),在正常的肝臟中檢測不到這種標志物,而在HCC患者的血清中，SCCA變異體則相對于健康人群以70%的敏感性和100％的特異性以游離免疫復合物(SCCA-IC)的形式被檢測出來.Hepa-IC是專為檢測肝細胞癌患者血清中的SCCA變異體而設計的一種敏感性和特異性均較高的試劑盒(2, 3).
在Hepa-IC的檢測中，以健康人肝臟作為陰性對照(<120AU/ML)(其表達的SCCA-IC濃度作為標準參照),大多數(70％)肝細胞癌樣本呈陽性反應 (mean±SD=2568.5±6796.3AU/ML)(FIG.2)，在26％的肝硬化患者中檢測到SCCA-IC，但其水平較低(mean ± SD =147.5±348.3AU/ML),而在慢性丙肝患者的樣方中,有18％的病人檢測到該種免疫復合物，但其水平非常低(mean± SD =39.5±89.7AU/ML).在AFP檢測中未發現此種相關性:迄今統計的42%的HCC患者中AFP水平有顯著升高(>20ng/ml),在分別用20ng/ml和100ng/ml的AFP作為排除閾值時,分別有96%或80％的HCC患者對一種標志物呈陽性反應.FIG.3比較了三種肝病患者和正常人對照組的SCCA-IC和AFP水平檢測的靈敏性、特異性、陽性預期值(PPV)及陰性預期值(NPV).
FIG.1:免疫組化技術顯示用抗SCCA變異體抗體著色后肝細胞癌(HCC)結節的外觀
FIG.2:利用Hepa-IC ELISA試劑盒檢測SCCA變異體和AFP分別在肝細胞癌HCC(n=60)、肝硬化CR(CR,n=60)、慢性肝炎CH(CH,n=60) 患者以及正常對照組中的血清水平
FIG.3:顯示在患有肝臟疾病的患者和正常對照組中利用SCCA-IC和AFP檢測在敏感性、特異性、陽性預期值和陰性預期值的對照.
規格
成份:
XG003-PL 多條帶化驗板: 96孔板上用親和純化的兔抗SCCA抗體預包被
XG003-IC SCCA-IC標準液：純化的人SCCA-IC標準液
XG003-EA第二抗體：酶聯二抗
XG003-CH Chromogen:顯色劑
G003-SB酶的底物溶液
XG003-DB稀釋緩沖液
XG003-WB清洗緩沖液
參考文獻
1、Pontisso P et al. (2004), Br. J. Cancer, 90(4):833-837
2、Beneduce L et al. (2004), J. Hepatol, 40 (suppl.1):77
3、Beneduce L et al. (2004), Digestive and Liver Disease, 36:A2-A3
所需儀器:
微孔板清洗裝置和酶標儀
簡要使用程序
標準曲線和標本:每孔加100μl的XG003-IC標準液(從250AU/ml連續稀釋直濃度為15.6AU/ml)及稀釋8倍的樣品溶液，以每孔加100μl的XG003-DB稀釋液作為空白。在室溫下孵育1小時，用XG003-WB清洗緩沖液沖洗6次。
第二抗體:每孔加100 μl的XG003-EA酶聯抗體在室溫下孵育1小時，用XG003-WB洗液漂洗6次。
ABTS 酶作用底物溶液:每孔加200μl新鮮配制好的ABTS底物溶液，置暗處使酶和底物反應顯色，并用ELISA酶標儀檢測每孔在405nm處的OD值。
FIG.4:底物孵育1小時后SCCA-IC標準曲線的線性范圍
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