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Hepa-IC酶聯(lián)免疫試劑盒

發(fā)布時(shí)間: :2009-11-07 00:03 瀏覽次數(shù): :
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詳細(xì)說(shuō)明:

 

 

 

Hepa-IC    XG003    
檢測(cè)肝細(xì)胞癌(HCC)中鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCCA)變異體免疫復(fù)合物的ELISA試劑盒
  
        肝細(xì)胞癌  (HCC)  是當(dāng)今世界上最為常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,  其發(fā)生率在各種癌癥中位居第四.  它的預(yù)后非常差,  在診斷后的五年中存活率還不到5%.由于缺乏足夠的高特異性和高敏感性的生物學(xué)標(biāo)志物來(lái)清楚區(qū)分肝細(xì)胞癌和其它受損肝臟,肝細(xì)胞癌的早期診斷還相當(dāng)困難.  甲胎蛋白(AFP)是現(xiàn)在最普遍用于診斷肝細(xì)胞癌的血清學(xué)標(biāo)志物,在大多數(shù)肝癌患者的血清中AFP水平有顯著升高(30-60%),但特異性較低(70-80%).  鱗狀細(xì)胞癌抗原  (SCCA)變異體是在肝臟外科手術(shù)切除的肝細(xì)胞腫瘤中發(fā)現(xiàn)的一種新型標(biāo)志物,利用其抗體(Hepa-Ab)(1)的免疫組化技術(shù)(FIG.1),在正常的肝臟中檢測(cè)不到這種標(biāo)志物,而在HCC患者的血清中,SCCA變異體則相對(duì)于健康人群以70%的敏感性和100%的特異性以游離免疫復(fù)合物(SCCA-IC)的形式被檢測(cè)出來(lái).Hepa-IC是專為檢測(cè)肝細(xì)胞癌患者血清中的SCCA變異體而設(shè)計(jì)的一種敏感性和特異性均較高的試劑盒(2,  3).  
        在Hepa-IC的檢測(cè)中,以健康人肝臟作為陰性對(duì)照(<120AU/ML)(其表達(dá)的SCCA-IC濃度作為標(biāo)準(zhǔn)參照),大多數(shù)(70%)肝細(xì)胞癌樣本呈陽(yáng)性反應(yīng) (mean±SD=2568.5±6796.3AU/ML)(FIG.2),在26%的肝硬化患者中檢測(cè)到SCCA-IC,但其水平較低(mean ± SD =147.5±348.3AU/ML),而在慢性丙肝患者的樣方中,有18%的病人檢測(cè)到該種免疫復(fù)合物,但其水平非常低(mean± SD =39.5±89.7AU/ML).在AFP檢測(cè)中未發(fā)現(xiàn)此種相關(guān)性:迄今統(tǒng)計(jì)的42%的HCC患者中AFP水平有顯著升高(>20ng/ml),在分別用20ng/ml和100ng/ml的AFP作為排除閾值時(shí),分別有96%或80%的HCC患者對(duì)一種標(biāo)志物呈陽(yáng)性反應(yīng).FIG.3比較了三種肝病患者和正常人對(duì)照組的SCCA-IC和AFP水平檢測(cè)的靈敏性、特異性、陽(yáng)性預(yù)期值(PPV)及陰性預(yù)期值(NPV).  
      FIG.1:免疫組化技術(shù)顯示用抗SCCA變異體抗體著色后肝細(xì)胞癌(HCC)結(jié)節(jié)的外觀
  
        FIG.2:利用Hepa-IC  ELISA試劑盒檢測(cè)SCCA變異體和AFP分別在肝細(xì)胞癌HCC(n=60)、肝硬化CR(CR,n=60)、慢性肝炎CH(CH,n=60)  患者以及正常對(duì)照組中的血清水平
  

  
        FIG.3:顯示在患有肝臟疾病的患者和正常對(duì)照組中利用SCCA-IC和AFP檢測(cè)在敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)期值和陰性預(yù)期值的對(duì)照.

規(guī)格

成份:
XG003-PL  多條帶化驗(yàn)板:  96孔板上用親和純化的兔抗SCCA抗體預(yù)包被
XG003-IC  SCCA-IC標(biāo)準(zhǔn)液:純化的人SCCA-IC標(biāo)準(zhǔn)液
XG003-EA第二抗體:酶聯(lián)二抗
XG003-CH  Chromogen:顯色劑
G003-SB酶的底物溶液
XG003-DB稀釋緩沖液
XG003-WB清洗緩沖液

參考文獻(xiàn)
1、Pontisso  P  et  al.  (2004),  Br.  J.  Cancer,  90(4):833-837
2、Beneduce  L  et  al.  (2004),  J.  Hepatol,  40  (suppl.1):77
3、Beneduce  L  et  al.  (2004),  Digestive  and  Liver  Disease,  36:A2-A3

所需儀器:
微孔板清洗裝置和酶標(biāo)儀

簡(jiǎn)要使用程序

標(biāo)準(zhǔn)曲線和標(biāo)本:每孔加100μl的XG003-IC標(biāo)準(zhǔn)液(從250AU/ml連續(xù)稀釋直濃度為15.6AU/ml)及稀釋8倍的樣品溶液,以每孔加100μl的XG003-DB稀釋液作為空白。在室溫下孵育1小時(shí),用XG003-WB清洗緩沖液沖洗6次。

第二抗體:每孔加100  μl的XG003-EA酶聯(lián)抗體在室溫下孵育1小時(shí),用XG003-WB洗液漂洗6次。

ABTS  酶作用底物溶液:每孔加200μl新鮮配制好的ABTS底物溶液,置暗處使酶和底物反應(yīng)顯色,并用ELISA酶標(biāo)儀檢測(cè)每孔在405nm處的OD值。

  
    FIG.4:底物孵育1小時(shí)后SCCA-IC標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍  

僅限  外用

 

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